Проведено конструирование новых векторов для редактирования генома дрожжей с помощью CRISPR/Cas9. Разработана и успешно применена система, позволяющая осуществлять клонирование новых мишеней с помощью стандартных методов: ПЦР ‒ рестрикция ‒ лигирование. Благодаря сконструированным векторам получены мутанты sup35-25, делеция гена PSH1 и дизрупция гена NAM7 (UPF1). Протестирован удобный способ идентификации плазмид с новой мишенью и приведено подробное описание использованной методики клонирования и отбора плазмид с новыми мишенями.
Нонсенс-мутации в жизненно важных генах SUP45 и SUP35,кодирующих факторы терминации трансляции,влияют на жизнеспособность клеток Saccharomyces cerevisiae. С помощью метода проточной цитофлуориметрии мы показали, что жизнеспособность мутантов по сравнению со штаммами дикого типа снижается в 3.5‒4 раза. Кроме того, мы обнаружили повышенную чувствительность мутантных клеток к ультразвуковому воздействию.
Индексирование
Scopus
Crossref
Высшая аттестационная комиссия
При Министерстве образования и науки Российской Федерации