By this author

Physiological Characteristics of <i>Saccharomyces cerevisiae</i> Strain Overexpressing Polyphosphatase Ppx1

Issue number 4 from 01.07.2023

Экзополифосфатаза Ррх1 дрожжей ‒ конститутивный белок, локализованный преимущественно в цитоплазме. Очищенный фермент гидролизует неорганические полифосфаты с высокой активностью, но у нокаут-мутанта ∆ppx1 Saccharomyces cerevisiae не выявлено изменений в физиологических свойствах. С целью выяснения функций этого фермента мы изучили физиологические особенности штамма Saccharomyces cerevisiae, сверхэкcпрессирующего полифосфатазу Ppx1. При культивировании на среде YPD штамм не проявил особенностей роста по сравнению с родительским штаммом. В клетках S. cerevisiae, сверхэкспрессирующих полифосфатазу Ррх1, в стационарной фазе роста в 9 раз увеличился уровень АТФ, значительно снизилась активность вакуолярной АТФазы, увеличилась чувствительность к перекиси по сравнению с родительским штаммом. Уровень АФК при этом был почти вдвое выше, чем у родительского штамма, по степени окисленности липидов различий не наблюдали. Cверхэкспрессия Рpx1 в использованных условиях культивирования не повлияла на уровень полифосфатов, поэтому эти полимеры не являются регуляторами вышеописанных изменений. Известно, что реакции на окислительный стресс и активность вакуолярной АТФазы у дрожжей регулируются цАМФ, а Ррх1 способна к гидролизу этого сигнального соединения. Мы предполагаем, что одной из функция Ррх1 в клетках дрожжей является участие в регуляции уровня цАМФ. В связи с тем, что сверхэкcпрессирующий Ррх1 штамм не отличался от родительского по содержанию неорганических полифосфатов, предположено, что наблюдаемые изменения обусловлены влиянием этого фермента на уровень цАМФ, который является его субстратом.

34 0

Knockout mutations in the genes encoding phosphate transporters impair adaptation of <i>Saccharomyces cerevisiae</i> to ethanol consumption

Issue number 5 from 15.09.2024

Переносчики фосфата в клетках дрожжей ответственны за гомеостаз фосфора, а также опосредованно вовлечены в регуляцию различных адаптивных процессов. Одним из таких процессов является адаптация клеток к потреблению этанола, которое требует значительных изменений в фосфорном обмене. В данной работе показано, что штаммы Saccharomyces cerevisiae с нокаут-мутациями в генах переносчиков фосфата PHO87, PHO89, PHO90 и PHO91 хуже приспосабливаются к потреблению этанола при его концентрации 4%. Это выражается как в удлинении лаг-фазы, так и в снижении скорости роста на активной стадии. Клетки мутантов отличаются по содержанию неорганических полифосфатов, но не ортофосфата, от родительского штамма: они содержат меньше длинноцепочечных полифосфатов. Этот эффект наблюдали при культивировании на этаноле, но не на глюкозе. При культивировании на среде, содержащей 4% этанол, штамм с нокаут-мутацией в гене PHO84, кодирующем переносчик фосфата и двухвалентных металлов, а также штаммы-нокауты по генам PHM6 и PHM7, ответственным за сверхнакопление полифосфатов, не проявили особенностей роста на среде с 4% этанолом по сравнению с родительским штаммом. Обсуждается возможная роль переносчиков фосфата и неорганических полифосфатов в адаптации дрожжей к потреблению этанола.

32 0