Статьи автора

Экспрессия гена P450-монооксигеназы гриба Curvularia sp. в бактериях Escherichia coli и подтверждение функции 7-гидроксилирования

Номер выпуска 2 от 15.03.2024

Разнообразие и уникальность грибных цитохромов Р450 (CYP), способных катализировать регио- и стереоспецифическое гидроксилирование стероидов, делает их важным объектом в области микробиологического синтеза ценных гидроксистероидов. В ходе настоящей работы изучена функция рекомбинантной грибной P450 монооксигеназы (CYPI) штамма Curvularia sp. ВКМ F-3040 — перспективного биокатализатора реакции 7-гидроксилирования стероидов андростанового ряда. Осуществлена ОТ-ПЦР амплификация кДНК последовательностей кандидатного гена CYPI и гена его природного редокс партнера (POR), их клонирование и гетерологическая экспрессия в клетках Escherichia coli BL 21 DE(3). В экспериментах in vitro показана способность полученной рекомбинантной монооксигеназы катализировать гидроксилирование дегидроэпиандростерона в положениях 7α и 7β. Полученные результаты расширяют знания о грибных стероидных гидроксилазах и открывают перспективы синтеза ценных 7-гидроксистероидов с использованием рекомбинантных продуцентов.

33 0